本發明涉及一種檢測組人堿性成纖維細胞生長因子(rhbFGF)的免疫膠乳微球及其制備方法,該免疫微球由抗hbFGF蛋白多克隆抗體包被,微球顆粒大小50nm;所述的免疫微球制備的方法,是根據原核細胞表達的優先密碼子重新修飾并構建全長人bFGF(hbFGF)基因表達序列,將基因序列通過限制酶切割插入谷胱甘肽-S-轉移酶(GST)基因融合表達載體中并進行細菌表達,利用親合層析柱純化獲得GST-hbFGF融合蛋白,以凝血酶切割該融合蛋白,經親合層析柱去除凝血酶后獲得人bFGF,再將佐劑溶合抗原后免疫小鼠,經分離純化得到hbFGF多克隆抗體,將抗體通過化學偶聯法偶聯活化后的微球,得到檢測hbFGF的免疫膠乳微球;所述的檢測hbFGF的應用,是指通過酶聯免疫吸附測定(ELISA)法,檢測hbFGF樣品,最低檢測限為hbFGF蛋白50pg/ml,相關系數R2=0.83;該免疫膠乳微球用于檢測重組人堿性成纖維細胞生長因子靈敏度較高,且操作簡單、重復性強。
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