本發明公開了一種牛支原體抗體光激化學發光免疫檢測試劑盒及其檢測方法,該試劑盒包括牛支原體P30蛋白單克隆抗體、山羊抗小鼠IgG偶聯的受體微珠、帶有His標簽的牛支原體P30蛋白抗原和鎳螯合的供體磁珠。本發明采用基因工程技術制備了牛支原體P30外膜蛋白,采用PEG1500細胞融合技術制備了牛支原體P30蛋白單克隆抗體,將純化后的重組P30蛋白作為抗原和制備的單克隆抗體間的相互作用,通過樣品中抗體與單克隆抗體競爭性結合重組P30蛋白,建立競爭性牛支原體抗體AlphaLISA的檢測方法。該檢測方法檢測時間短,特異性好,靈敏度高,不需洗滌,操作簡便,檢測成本低。
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