本發明公開了一種定量T4多聚核苷酸激酶活性測定方法,所述方法包括如下步驟:在用于磷酸化的反應體系中,以寡核苷酸為底物,加入ATP,利用T4多聚核苷酸激酶使該寡核苷酸的5’端磷酸化,生成磷酸化寡核苷酸;隨后向該反應體系中加入熒光素酶報告基因系統,該熒光素酶報告基因系統中的熒光素酶利用該反應體系中的剩余ATP使熒光素氧化生成氧合熒光素,同時產生化學發光;檢測發光數值,由檢測結果推導出T4多聚核苷酸激酶活性程度,其中該T4多聚核苷酸激酶活性程度與發光量負相關。與現有技術相比,本發明方法無放射性污染,操作簡單方便,并且可以對T4多核苷酸激酶活性進行定量的檢測分析。
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