本發明公開了一種運用特定區段隨機突變法改造漆酶的方法及漆酶菌株lac123。本發明通過分析,選定LAC1第二結構域和第三結構域靠近漆酶活性位點附近的重要功能區段作為靶標序列,在對該序列DNA進行化學合成時,采用簡并引物法在特定的若干個堿基位點引入隨機突變,并將合成好的隨機片段通過同源重組的方法,對野生酶的相同片段進行替換,構建包含特異區段特定位點DNA序列的隨機突變庫,通過二代測序對庫容量進行檢測,并對隨機突變庫中的大腸桿菌克隆進行漆酶活性的批量篩選,初篩到了5株酶活有所提升的漆酶,經過搖瓶復篩得到一株酶活提升2.3倍的突變漆酶菌株LAC123,其表達蛋白序列如SEQ ID NO:3所示。
聲明:
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我是此專利(論文)的發明人(作者)