本發明涉及一種利用枯草芽孢桿菌表達天蠶素AD的方法及其制備方法。以枯草芽孢桿菌WB800N為宿主菌株,大腸?枯草穿梭載體為表達載體,設計合成融合蛋白編碼基因(SPSacB)SUMO?CAD,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示,其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示,成功構建重組表達載體pGJ148?(PSacB)SUMO?CAD。應用化學轉化方式轉入宿主菌感受態細胞中,利用麥芽糖誘導發酵,實現外源蛋白成功表達,通過NI?NTA柱和蛋白質純化分析儀純化后獲得了純度較高的融合蛋白,利用SUMO酶切后獲得重組抗菌肽,之后對發酵條件進行優化。本發明成本低,利于分離純化。
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