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    重組G-17蛋白及其單克隆抗體的制備

    995   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
    2023-03-19 08:11:50
    本發明屬于生物技術領域。本發明提供了一種重組蛋白,該重組蛋白包含胃泌素?17(以下稱G?17)全部抗原表位,并將全部抗原表位序列通過柔性片段(連續四個甘氨酸)連接后重復十次,形成重組G?17蛋白氨基酸序列。為提高該重組蛋白在原核表達系統中的產量,采用大腸桿菌偏愛密碼子將該重組蛋白氨基酸序列轉換為對應核苷酸序列,通過化學合成該核苷酸序列并構建重組蛋白表達載體。本發明還涉及該重組蛋白單克隆抗體的制備,經過抗原免疫、細胞融合及多輪篩選后得到單克隆細胞株。純化的單克隆抗體經過蛋白分子相互作用儀篩選出優勢抗體配對,分別標記熒光微球和包被NC膜,通過實驗確定最佳單抗配對組合,可用于G?17的定量檢測。
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