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    2-甲基檸檬酸高產基因工程菌及其構建方法

    977   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
    2023-03-19 08:11:53
    本發明涉及一種2?甲基檸檬酸高產基因工程菌及其構建方法,屬于基因工程技術領域。本發明的2?甲基檸檬酸高產基因工程菌是由蘇云金芽胞桿菌BMB171基因組中敲除2?甲基檸檬酸脫水酶基因prpD而得到的。本發明還提供了上述2?甲基檸檬酸高產基因工程菌的構建方法,以蘇云金芽胞桿菌BMB171為出發菌株,利用基于歸巢內切酶I?SceI誘發染色體同源重組機制的基因敲除體系成功獲得2?甲基檸檬酸脫水酶(PrpD)基因無痕缺失突變株ΔprpD。通過液相色譜和質譜的檢測發現,與出發菌株BMB171相比,ΔprpD菌株胞內2?甲基檸檬酸濃度提高了217倍,且與化學法合成的2?甲基檸檬酸相比,本發明法所產生的2?甲基檸檬酸空間構型專一。
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