本發明公開了生產MSTN雙側基因敲除的雙肌性狀體細胞克隆豬的方法,其利用高效簡便的基因修飾技術TALEN技術,設計構建能高效敲除MSTN基因的質粒;通過電轉染法轉染豬胎兒成纖維細胞,磁珠分選陽性細胞作為供體細胞,化學輔助去核方法去核后進行體細胞核移植;經胚胎移植確定妊娠后26-36天取出胎兒進行基因測序,以MSTN雙側基因敲除胎兒細胞作為供體細胞再次體細胞核移植,胚胎移植;足月分娩后免疫組化及形態學觀察,確定為雙肌性狀克隆豬。獲得MSTN-/-雙側敲除的雙肌性狀克隆公豬,取精液對發情母豬進行人工受精,獲得大量雙肌豬。本發明工藝簡單,易于實施,且可產業化生產雙肌豬,利于農業生產和醫學研究。
聲明:
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我是此專利(論文)的發明人(作者)