本發明涉及一種基于靶標蛋白誘導DNA酶循環生成的均相免疫分析方法。該免疫分析方法的檢測溶液包括抗體1?DNA1偶聯物、抗體2?DNA2偶聯物、血紅素hemin、核酸外切酶III和DNA3/DNA4雙鏈DNA。當靶標蛋白存在時,可被抗體1?DNA1偶聯物和抗體2?DNA2偶聯物同時免疫識別,基于鄰位效應,DNA1與DNA2進行雜交形成復合物,而后與雙鏈DNA上的DNA3發生鏈取代反應,進而釋放出富含G序列的DNA4與hemin結合形成G?四鏈體/hemin DNA酶,此外,與DNA1和DNA2反應的DNA3能被核酸外切酶III識別并切斷,使得DNA1和DNA2可與另一個DNA3發生鏈取代反應,從而釋放另一個DNA4生成DNA酶,如此循環,生成大量的DNA酶。該DNA酶可催化TMB顯色和魯米諾發光,通過比色或化學發光成像的方法可對靶標蛋白進行靈敏的定量分析。該免疫分析方法操作簡單、快速、靈敏、普適性高,具有一定的臨床應用價值。
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