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    TGFβR1（T204D）酶活性的快速檢測方法及其應用

    1172   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
    2023-03-19 07:13:11
    本發明屬于生物化學技術領域，具體涉及一種TGFβR1(T204D)酶活性的快速檢測方法及其應用。檢測方法為：(1)取待測樣品、空白對照品、陽性對照品分別與TGFβR1(T204D)酶、TGFβR1底物/ATP混合液共孵育進行激酶反應產生ADP；(2)向步驟(1)的三組激酶反應體系中分別添加ADP?GloTM反應試劑共孵育，終止激酶反應并消耗完剩余ATP；(3)向步驟(2)的三組反應體系中分別添加激酶檢測試劑共孵育，使ADP轉化成ATP，并讀取新合成的ATP的發光值RLU；(4)按酶活＝(RLU(Sample)?RLU(Blank))/(RLU(Pos.Ctrl)?RLU(Blank))×100％計算TGFβR1(T204D)酶活。該方法基于ADP?GloTM激酶實驗，直接測定反應中消耗的ATP來定量反應的進程。完成全部實驗只需一天，大大縮短了檢測時間。該方法可應用于TGFβR1(T204D)受體抑制劑和此靶點相關的抗腫瘤藥物的篩選。
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