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    多器官細胞基因突變檢測基因編輯小鼠模型的構建及應用

    966   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
    2023-03-19 07:19:35
    本發明提供一種CD59基因編輯小鼠模型，它是定點敲入CD59?增強型綠色熒光蛋白(EGFP)表達序列片段的小鼠。本發明還提供構建CD59?EGFP基因編輯小鼠模型的方法，是利用CRISPR?Cas9基因編輯技術在小鼠基因ROSA26位點定點敲入CD59?EGFP基因序列的方法，包括：設計并獲得向導RNA，制備向導RNA與Cas9蛋白混合物；構建CD59?EGFP打靶載體；顯微共注射與F0代小鼠獲得，F1代小鼠獲得；CD59?EGFP打靶載體中，CD59的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，EGFP的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本發明的基因編輯小鼠模型對致突變化學物有應答，分離其肝細胞、生殖細胞，在熒光顯微鏡下通過綠色熒光可以顯示CD59胞膜定位，可用于化學物的多器官細胞致突變性檢測。
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