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    Nanos2啟動子核心區域關鍵轉錄因子的驗證方法

    1182   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
    2023-03-19 07:29:30
    本發明公開了一種Nanos2啟動子核心區域關鍵轉錄因子的驗證方法：首先，對Nanos2?5’側翼區序列進行PCR擴增，構建真核表達載體pNanos2?EGFP，將pNanos2?EGFP、pEGFP?N1、pLinker?EGFP分別轉染DF?1細胞，以對Nanos2啟動子區定性分析；分別構建啟動子5’端不同長度缺失載體pGL3?1187、pGL3?959、pGL3?788、pGL3?493、pGL3?155與pRL?SV40共轉染DF?1細胞，進行雙熒光素酶報告基因檢測以對Nanos2啟動子核心區域進行鑒定，構建缺失核心區域載體，再次進行雙熒光素酶活性分析，觀察是否缺失核心區域后啟動子活性喪失或顯著降低；對Nanos2啟動子核心區域進行轉錄因子結合位點預測，進行雙熒光素酶報告分析和CHIP試驗確定關鍵轉錄因子。通過細胞形態學觀察、qRT?PCR、細胞免疫化學、流式細胞分析等方法檢測雄性生殖細胞分化情況。
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    聲明：
    “Nanos2啟動子核心區域關鍵轉錄因子的驗證方法” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究，如用于商業用途，請聯系該技術所有人。
    我是此專利(論文)的發明人(作者)
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