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    新的TGF-β信號通路在如皋黃雞雄性生殖細胞分化過程中功能驗證方法

    1141   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
    2023-03-19 07:32:28
    本發明公開了一種新的TGF?β信號通路在如皋黃雞雄性生殖細胞分化過程中功能驗證方法：首先基于RNA?seq數據源進行關鍵信號通路富集并篩選；利用TGFβ受體抑制劑 : LY2109762，BMP4受體抑制劑 : LDN193189在體內和體外兩個水平對TGF?β信號通路進行抑制以驗證該通路在雞雄性生殖細胞分化過程中的具體功能；設計LY2109762+BMP4，LDN193189+BMP4以及Double+BMP4實驗組進行實驗，實驗過程中每個1d，取樣一次。檢測Smad2，Smad5的表達變化以及生殖標記基因的表達變化，利用間接免疫熒光和FACS檢測各分組中細胞誘導后interginα6+interginβ1+細胞數量；采用雞胚注射方式將抑制劑注射雞胚，設計實驗組：Y2109762，LDN193189以及Double組，孵化過程中于4d和18d取樣，檢測Smad2，Smad5的表達變化以及生殖標記基因的表達變化，利用組織免疫化學和FACS檢測各分組中18d后睪丸中interginα6+interginβ1+細胞數量。
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