本發明公開了一種用于葡萄糖傳感器的融合蛋白的制備方法,其步驟是:首先合成編碼聚賴氨酸的DNA鏈,將合成的DNA鏈在65℃褪火形成雙鏈的短DNA片段;其次是通過基因拼接,構建融合蛋白的表達載體pPICGLT;第三是表達載體pPICGLT經限制性內切酶StuⅠ線性化后,用原生質體轉化法轉化進酵母中;第四是酵母重組子的篩選,提取酵母的基因組DNA作檢測;第五是融合蛋白的表達、純化,轉化子在30℃下MM培養基中培養72小時,每24小時加一次甲醇;第六是融合蛋白與介體的連接;第七是葡萄糖傳感器的制備;第八是電化學檢測。本發明制備葡萄糖傳感器測量線性范圍寬,可達45mmol/L,且響應信號大,保存期長。
聲明:
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