本發明涉及一種蛋白發酵生產方法,其為一種重組大腸桿菌發酵過程中蛋白滲漏與熱分離相結合的集成化生產方法。本發明成功地將化學滲漏法直接應用于發酵過程中,實現了菌體生長和重組蛋白選擇性滲漏協調地進行。重組蛋白滲漏不僅簡化了純化重組蛋白的工藝,也提高了目標產物的表達水平。同時,選用優化的培養基組成,針對熱穩定性重組蛋白(如目標蛋白和硫氧還蛋白的融合蛋白)產物,在發酵過程結束時加熱后再離心。熱處理不僅進一步促使蛋白的滲漏,而且使相當多的雜蛋白、核酸等變性后沉淀下去。經檢測,超過90%的重組蛋白滲漏到培養基中,且離心后上清液中重組蛋白的純度可達60%~70%。
聲明:
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