本發明公開了一種體外培養制備AFP單克隆抗體的方法,首先復蘇雜交瘤細胞,制備種子細胞;將無菌的中空纖維系統內循環系統的進液端和PBS/培養基供應瓶連接,出液端和廢液瓶連接,將中空纖維系統外循環系統的進液端和PBS/培養基供應瓶連接,出端和廢液瓶連接用PBS和培養基對其進行潤洗;然后將種子細胞導入;培養過程中持續進行葡萄糖和乳酸的監測,去除代謝廢物,同時不斷補充新鮮的培養基,采用20L桶進行培養基的儲備,減少操作頻次;收獲的培養上清進行親和純化后得到抗體濃度5mg/mL,純度95%以上的單抗成品。本發明制備的單抗特異性好,靈敏度高且效價高,用于AFP化學發光檢測試劑盒中,能大大提高試劑盒的靈敏度、特異性和穩定性。
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