本發明涉及一種基于酰肼化學法的選擇性富集蛋白樣品酶解液中N-端絲氨酸/蘇氨酸肽段的方法。取生物樣品,使用胰蛋白酶Trypsin酶解,并用PNGase?F酶去除糖鏈,然后用高碘酸鈉將蛋白酶解液中的N-端為絲氨酸或者蘇氨酸的肽段選擇性氧化為N-端為醛基結構的肽段,之后利用酰肼材料富集氧化后的肽段并使用鹽酸羥胺處理,最后對釋放的肽段進行LC-MS/MS分析來獲得肽段和蛋白的鑒定結果。由于只選擇性富集其中的N-端絲氨酸/蘇氨酸肽段,因此可用于蛋白質組樣品酶解液的簡化。該富集方法原理簡單,容易操作,富集特異性高。
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