本發明公開了一種堿基修飾核苷酸的合成方法及其用途;所述方法包括將各種修飾核苷在磷酸化試劑的作用下,選擇性地生成5′-核苷三磷酸;這些磷酸化試劑包括反應過程中原位生成的環狀磷酸化試劑以及三氯氧磷和三丁基焦磷酸銨協同作用下的反應產物。本發明合成的堿基修飾核苷酸在DNA測序、標記、延伸等生物學領域廣泛使用,目前其銷售價格很高,合成方法復雜,反應選擇性差,副反應多,不好分離純化;而本發明提供的合成方法選擇性好,副反應少,容易分離純化,且所需實驗條件易得,合成過程均為常規化學反應,可用于大規模推廣使用。
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