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    利用HTRF技術篩選UBC12/Dcn1小分子抑制劑的方法

    744   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
    2023-03-19 08:56:57
    本發明涉及藥物化學領域,具體公開了一種利用HTRF技術篩選UBC12/Dcn1小分子抑制劑的方法。該方法先成功構建并原核表達純化得到純度較高的GST?Dcn1重組蛋白,合成UBC12 N末端乙?;揎椀??12個氨基酸序列作為底物。用分子間相互作用確定UBC12和Dcn1有活性并且能相互作用;然后再利用HTRF技術建立優化的UBC12/Dcn1活性測定平臺。該反應體系穩定,可耐受較寬的pH范圍(5.5?8.0)及二價金屬離子、螯合物等;背景低,受到樣品的干擾非常少,假陽性假陰性均低,可去除天然產物自發熒光的干擾,靈敏度高;易于實現微型化,通量高。
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