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    柑桔衰退病毒侵染性克隆的構建及接種方法

    906   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
    2023-03-19 00:27:23
    本發明公開了一種柑桔衰退病毒侵染性克隆的構建方法,步驟:(1)三個覆蓋CTV基因組全長特異片段CTV1、CTV2、CTV3的長鏈RT?PCR擴增;(2)三元穿梭載體pCY線性化;(3)TAR克?。翰捎么姿徜囖D化法將CTV1、CTV2、CTV3回收片段和線性化的三元穿梭載體pCY共轉化酵母菌YPH501;(4)轉化農桿菌;(5)農桿菌介導接種,從而鑒定獲得CTV侵染性克隆。還公開了侵染性克隆的接種方法:(1)播種:柑桔種子剝去外種皮播于培養基,暗培養;2)離心收集攜帶CTV侵染性克隆與Hc?Pro或P19表達質粒的農桿菌細胞,用接種緩沖液懸??;(3)真空浸潤;(4)暗培養。
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