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    用于磷酸化肽的富集材料制備方法及應用

    2358   編輯:中冶有色網   來源:杭州惟宸生物科技有限公司  
    2022-05-06 17:03:49
    權利要求 1.用于磷酸化肽的富集材料制備方法,其特征在于:包括以下步驟: 步驟一、模板分子選擇:首先采用分子對接、計算機模擬的方法,針對待富集的特異性磷酸化多肽,考慮模板化合物對pH值、溫度的穩定性,印跡聚合物形成時間和空間立體結構等因素的影響,虛擬合成磷酸化肽富集分子印跡材料,以此選出最佳的模板化合物; 步驟二、富集磷酸化肽的分子印跡納米顆粒制備:以步驟一中選擇出的最佳模板化合物,以甲基丙烯酸為功能單體,在氮氣保護下混合改性硅膠納米顆粒,應用分子印記技術結合微波輔助合成方法,制備磷酸化肽的分子印跡納米顆粒。2.根據權利要求1所述的用于磷酸化肽的富集材料制備方法,其特征在于:步驟二中所述應用分子印記技術結合微波輔助合成方法,制備磷酸化肽的富集材料,具體方法包括: (1)將模板化合物和功能單體甲基丙烯酸分散在乙腈溶液中充分混合、靜置;在該混合溶液中加入交聯劑,充分搖勻,模板化合物與交聯劑的摩爾比為1:32~1:12,持續靜置6~10小時,制得預聚合溶液; (2)在氮氣保護下,將改性硅膠納米顆粒與預聚合溶液,攪拌混合,再加入引發劑,混合均勻后,微波輔助聚合反應;反應結束后,停止加熱,產物冷卻至室溫、離心分離;產物用甲醇-酸水混合液反復超聲清洗,直至液相色譜檢測不到模板化合物;然后將其至于在35~55℃下真空干燥,制得特異性磷酸化肽的分子印跡納米顆粒。 3.根據權利要求2所述的用于磷酸化肽的富集材料制備方法,其特征在于:所述改性硅膠納米顆粒的制備方法包括: 將SiO 2顆粒與硅膠改性劑混合,氮氣保護下充分攪拌,使之均勻分散于甲苯中,并去除溶液中的氧氣,混合物于70℃±10℃條件下持續充氮回流反應過夜,待反應完成后,離心分離,產物用乙醇和去離子水順序洗滌,真空或冷凍干燥,得到改性硅膠納米顆粒;其中SiO 2顆粒與硅膠改性劑的質量比為1:6~1:24。 4.根據權利要求2所述的用于磷酸化肽的富集材料制備方法,其特征在于:所述改性硅膠納米顆粒的制備方法包括: A、將FeCl 3~6H 20和FeCl 2·4H 2O混合溶液,加入氨水調節溶液pH值至11.5~12.5,在氮氣保護下攪拌,微波輔助合成得到Fe 3O 4
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