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    釀酒酵母gsh1缺失突變株的構建方法及應用

    875   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
    2023-03-18 23:32:20
    本發明公開了一種釀酒酵母gsh1缺失突變株的構建方法及應用,步驟是:A、獲得Δgsh1突變株:釀酒酵母基因同源重組敲除原理、引物設計、敲除片段轉化方法按照文獻所描述的方法進行(Yeast,1998,14:953-962),該方法是目前釀酒酵母中基因敲除的通用方法;依據釀酒酵母gsh1基因序列設計引物:上游引物P1和下游引物P2;利用上游引物P1和下游引物P2對質粒pFA6a-Kan?MX6進行PCR擴增,獲得含釀酒酵母gsh1基因上下游序列的敲除片段;通過醋酸鋰/PEG的轉化方法將敲除片段導入釀酒酵母BY47421菌株細胞,篩選得到釀酒酵母的Δgsh1突變株YJL101C。利用微生物遺傳學方法構建釀酒酵母細胞Δgsh1突變株,再利用突變株進行氯化鎘等重金屬細胞毒性的檢測,以提高細胞毒性檢測靈敏度,方法易行,操作簡便。
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