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    三元穿梭載體及利用其構建CYVCV侵染性克隆的方法

    992   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
    2023-03-19 00:32:06
    本發明公開了一種三元穿梭載體pTY，其序列如SEQ?ID?NO:11所示。還公開了一種利用pTY構建柑桔黃化脈明病毒(CYVCV)侵染性克隆的方法，包括如下步驟：(1)制備CYVCV全長cDNA；(2)采用限制性內切酶Stu?I、Sma?I酶切如SEQ?ID?NO:11所示三元穿梭載體pTY，得到pTY線性化的載體；(3)酵母轉化伴隨的同源重組：采用醋酸鋰法將線性化載體pTY與CYVCV全長cDNA共轉化酵母菌YPH501；(4)侵染性克隆鑒定：同源重組質粒轉化農桿菌C58C1，篩選獲得CYVCV侵染性克隆。本發明有效克服了病毒全長cDNA片段在大腸桿菌中產生毒性或不穩定導致克隆失敗的現象。
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    “三元穿梭載體及利用其構建CYVCV侵染性克隆的方法” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究，如用于商業用途，請聯系該技術所有人。
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